Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
Биоаналитическую часть испытаний биоэквивалентности следует проводить в соответствии с принципами надлежащей лабораторной практики (GLP).
Для определения концентрации действующих веществ в плазме, сыворотке или цельной крови, а также моче могут быть использованы различные методы (физико-химические, иммунологические, микробиологические и др.), обеспечивающие возможность получения достоверных лабораторных данных о концентрации действующего вещества при выбранных условиях фармакокинетического исследования, в частности, его длительности, и отвечающие общим требованиям избирательности, точности, воспроизводимости.
Если вследствие пресистемной элиминации лекарственного средства оно не обнаруживается в крови в неизмененном состоянии и не обладает фармакологической активностью (пролекарство), необходимо определять концентрацию биологически активного метаболита.
Чтобы получить достоверные результаты, которые могут быть удовлетворительно интерпретированы, биоаналитические методы, используемые для определения активной части действующего вещества и/или продукта (продуктов) его биотрансформации в плазме крови, сыворотке, крови или моче, или любом другом подходящем биоматериале, должны быть надлежащим образом охарактеризованы, полностью валидированы и документированы. Основная цель валидации метода -доказать надежность конкретного метода для количественного определения концентрации анализируемого вещества (веществ) в данном биологическом субстрате. К характеристикам биоаналитического метода, которые важны для обеспечения приемлемости его свойств и достоверности всех результатов анализа, относятся:
1) стабильность имеющихся растворов и анализируемого вещества (веществ) в биологическом субстрате в условиях обработки и в течение всего периода хранения;
2) специфичность;
3) правильность;
4) точность;
5) предел количественного определения и предел обнаружения;
6) линейный диапазон определяемых концентраций лекарственного вещества в биожидкостях.
Валидация биоаналитического метода должна состоять из двух отдельных фаз:
1) фазы, предшествующей исследованию, в ходе которой проверяется соответствие метода количественного определения шести указанным выше характеристикам; и
2) фазы самого исследования, в ходе которой валидированный биоаналитический метод применяют для реального анализа проб биоисследования в основном для того, чтобы подтвердить стабильность, правильность и точность.
Калибровочную кривую необходимо строить для каждого анализируемого вещества в каждой серии аналитических определений; ее необходимо использовать для вычисления концентрации анализируемого вещества в образцах с неизвестным содержанием в данной серии определений. Калибровочная кривая должна включать нулевой образец (blank) и 6-8 образцов с концентрациями определяемого соединения, охватывающими спектр прогнозируемых концентраций лекарства в биологических жидкостях. С периодичностью, установленной с учетом общего количества образцов, вместе с обработанными испытуемыми образцами следует анализировать ряд отдельно приготовленных для контроля качества образцов. Кроме того, необходимо валидировать способ обработки биологических образцов и обращения с ними.
Для проверки достоверности количественного определения лекарства в образцах выполняют точечный контроль, который заключается в повторном определении концентрации лекарства как минимум в 3 образцах различной концентрации с целью окончательного принятия или отклонения результатов аналитического этапа.
Все процедуры следует выполнять в соответствии с предварительно установленными стандартными рабочими методиками (СОПы). Необходимо представить и обсудить все используемые для валидации биоаналитического метода процедуры и формулы, имеющие отношение к делу. Любое изменение биоаналитического метода перед анализом исследуемых образцов и во время его проведения может потребовать адекватной ревалидации; следует сообщать обо всех изменениях и обосновывать масштаб ревалидации.
Исследования биоэквивалентности, представляемые в регистрационных досье на аналогичные по существу лекарственные препараты, которые содержат хираль-
ные действующие вещества, должны быть проведены с использованием биоанали-тических методов, специфичных в отношении энантиомеров. Исключение составляют случаи, когда
1) оба препарата содержат один и тот же стабильный одиночный энантиомер;
2) оба препарата содержат рацемат, и оба энантиомера характеризуются линейной фармакокинетикой.
8. АНАЛИЗ ФАРМАКОКИНЕТИЧЕСКИХ ДАННЫХ
Оценка биодоступности лекарственного средства или его основного биологически активного метаболита (если изучаемые препараты представляют собой пролекарства) основывается на сравнении значений фармакокинетических параметров, оцененных непосредственно по данным «концентрация (С) - время (t)» для исследуемого препарата и препарата сравнения.
Графическое представление данных фармакокинетики исследуемых (тестируемый и эталонный) препаратов может производиться как с помощью несглажен-ных кривых (проходящих через точки, соответствующие значениям измеренных концентраций), так и сглаженных кривых (не выходящих за пределы доверительных интервалов в каждой точке измерения).
